Агротехника

О микроклональном размножении флокса метельчатого  

В интернете (и не только) нередко встречается отрицательное мнение о микроклонировании флоксов. Высказываются опасения, что флоксы, полученные in vitro, вследствие мутаций теряют сортность. Более того, якобы «могут быть отсроченные мутации, которые проявятся через много лет». Однако в любом живом организме идет постоянный мутационный процесс. Да-да, и в нашем организме тоже! Таким образом, за долгие годы в любом сорте накопится множество мутаций, будь он размножен меристемой или обычным черенкованием. Большинство этих мутаций столь незначительны, что не проявятся внешне. Значительная часть мутировавших клеток будет уничтожена защитными силами самого организма. Нередко мутации вызывают снижение жизнестойкости растения, и эта группа постепенно отомрет. Но возможны и устойчивые мутации с явными внешними проявлениями. В случае появления новых полезных (продуктивных или декоративных) признаков мутанты могут быть использованы для получения новых сортов. На этом основана мутационная селекция. Пример: карликовые формы растений, растения с вариегатной листвой, с махровыми цветками и т д. Все это было еще задолго до появления микроклонального размножения растений и имеет место сейчас.
Более обоснованными являются опасения, что обработка реактивами при микроклональном размножении вызовет увеличение количества мутаций. При размножении in vitro используются различные технологии. Каждый случай требует отдельного изучения. Действительно существуют варианты усиленного воздействия на исходный растительный материал с целью ускорения получения регенерантов. В таких случаях возможность потери сорта значительно увеличивается.
В мире науки принято опираться на факты, поэтому все мои выводы основаны на личном опыте в этой области. В свое время Агрофирма «Поиск» (теперь Агрохолдинг «Поиск») заказала во Всероссийском научно-исследовательском институте овощеводства (ВНИИО) разработку методики клонального микроразмножения флокса метельчатого. В сокращенном виде с этой методикой можно познакомиться в брошюре «Флокс метельчатый: от пробирки до цветника» (ГНУ ВНИИО Россельхозакадемии, ООО «АГРОФИРМА ПОИСК», 2007 г.). В мои задачи входило обеспечивать качественный материал для микроклонирования, забирать полученные регенеранты флоксов и работать с ними в дальнейшем на базе Егорьевского тепличного комбината. Как я уже сообщала ранее, адаптированные микроклоны флоксов были высажены в ЕТК в открытом грунте и после подращивания использовались в качестве маточников для традиционного черенкования. По каждому сорту было посажено 100-200 экз. Флоксы, выращенные из черенков с этих кустов, поступали в продажу. В частности, так были массово размножены новые на тот момент сорта Е.А.Константиновой – `Гжель`, `Маргарита`, `Анна Каренина` и другие. (Разумеется по договору с автором и при использовании ее сортового материала). Кусты, выращенные из микроклонов, находились под моим постоянным наблюдением на протяжении всего времени использования их в качестве маточников (2 года доращивания и не менее 5 лет использования в производстве). Впоследствии маточники возобновлялись за счет взятых с них же черенков. Таким образом, общий срок наблюдений за микроклонами и их вегетативным потомством составил почти 15 лет. Как показали наблюдения, это был однородный материал, соответствующий сортовым признакам, за одним исключением. Очень большое расщепление показал химерный сорт `Мишенька`. Почти половина регенерантов имела однотонную окраску вместо сортовой полосатой. Такие кусты удалялись, но в некоторых оставшихся растениях со временем вновь появлялись побеги с однотонными цветками. Приходилось откладывать продажу до цветения и проводить выбраковку нестандартных растений. Все это приводило к большим дополнительным расходам. В итоге было принято решение об исключении сорта `Мишенька` из ассортимента ЕТК. Справедливости ради, стоит напомнить, что большой процент расщепления наблюдается и при традиционном черенковании сорта `Мишенька`. И реверс для этого сорта обычное явление (и у других химер тоже, не только у флоксов, но и, например, у сенполий).
Для сравнения хочу отметить, что за этот же период были выявлены следующие явные мутации на флоксах, которые размножали традиционным методом черенкования (не все сорта у нас размножены микроклонально):
-махровый венчик на одном из сеянцев;
-побеги с вариегатной листвой на следующих сортах: `Иван-Заря`, `Мисс Мари`, `Анфиса`, `Всемил`;
-побег с золотистой листвой у сорта `Цвет Яблони` (форма ауреа). На фото ниже сорт Цвет Яблони типичные побеги и побеги с золотистой листвой, сеянец с увеличенным количеством лепестков, сорт Мишенька и маточники сортовых флоксов в ЕТК.

Были приложены все усилия, чтобы сохранить эти интересные мутации. Но махровый сеянец и почти все вариегатные флоксы показали низкую жизнестойкость. На данный момент проходят испытания 2 вариегатных сеянца. А вот `Цвет Яблони` с золотистой листвой не уступает в жизнестойкости исходному, успешно прошел испытания и скоро будет запущен в производство. Учитывая выдающиеся сортовые качества сорта `Цвет Яблони`, его мутация с золотистой листвой несомненно заинтересует флоксоводов.
Радует, что флоксы, размноженные in vitro показали более высокую жизнестойкость, поскольку в процессе микроклонирования они были освобождены от патогенных бактерий и грибов. Вероятно, вирусы также погибают при такой обработке, но эти исследования нами не проводились, поэтому не берусь утверждать.
Мне задавали такой «каверзный» вопрос: «А вы проводили генетический анализ полученных растений? И если не проводили, то как вы можете утверждать, что это именно тот сорт?» Генетический анализ мы не проводили, точно так же, как не проводили его другие селекционеры флоксов, независимо от способа размножения посадочного материала. Разве сорта, размноженные делением куста или черенкованием, кто-то подвергал генетическому анализу? Нет? Тогда так ли уж это необходимо при микроклональном размножении? Впрочем, генетический анализ становится все более доступным, и со временем мы будем его использовать, если возникнет такая необходимость.
При определении сорта специалисты опираются на совокупность сортовых признаков. В отношении флоксов в настоящее время рекомендуется использовать «Методику проведения испытаний на отличимость, однородность и стабильность. Флокс метельчатый, флокс пятнистый и их гибриды», утвержденную Государственной комиссией РФ по испытанию и охране селекционных достижений 27.01.2006 г. (gossortrf.ru/metodiki-ispytaniy-na-oos). Кстати, эта методика была разработана Е.А.Константиновой и мной на базе ВНИИО.

ВЫВОДЫ:
1. Микроклональное размножение флоксов является прогрессивным современным способом ускоренного размножения сортовых флоксов. При правильной технологии не наблюдается увеличения количества мутаций в сравнении с традиционными методами вегетативного размножения.
2. В результате микроклонирования происходит оздоровление посадочного материала за счет уничтожения патогенных грибов и бактерий.
3. Не все сорта флоксов одинаково хорошо размножаются in vitro. Сложнее вводятся в культуру сорта с темно-красной и темно-фиолетовой окраской венчика.


В.Г. Борисова, кандидат биологических наук, селекционер флоксов.

Комментарии